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针刺对Ⅳ型变态反应模型豚鼠干预作用的研究

2018-05-09 11:59:58    作者:admin    www.5alw.com

                     作者:谢长才,许能贵,符文彬,孙健

【摘要】    【目的】观察针刺对Ⅳ型变态反应模型豚鼠的影响。【方法】选用白化豚鼠36只,随机分为3组:空白组、模型组、针刺组;后2组采用二硝基氯苯(DNCB)外用致敏及反复激发方法复制豚鼠Ⅳ型变态反应模型;针刺组电针曲池及血海穴,治疗10d后取材,观察耳厚度与质量、真皮内炎症细胞数及病理变化。【结果】模型组耳厚度和质量显著性升高(P<0?01),单核细胞与淋巴细胞数、中性与嗜酸性粒细胞数显著升高(P<0?05),并出现慢性湿疹的病理改变;针刺组可显著降低模型豚鼠耳厚度与质量(均P<0?05),一定程度降低炎症细胞数(P>0?05),并可明显减轻皮肤慢性湿疹的病理改变。【结论】针刺具有一定的抗Ⅳ型变态反应作用。

【关键词】  变态反应/针灸疗法;皮肤/病理学;疾病模型,动物;豚鼠;穴,曲池;穴,血海

  Abstract: ObjectiveTo observe the intervention of acupuncture on guinea pig models of allergic reaction type Ⅳ.MethodsThirty?six albino guinea pigs were randomized into blank control group,model group,and acupuncture group.The guinea pig models of allergic reaction type Ⅳ were established by external application of dinitrochlorobenzene.The acupuncture group received acupuncture on acupoints of Quchi and Xuehai for 10 days.After treatment,the auricular thickness and weight,the number of intradermal inflammatory cells,and the auricular pathological changes in guinea pigs were observed.Results In the model group,the auricular thickness and weight were increased,and the number of intradermal monocytes,lymphocytes,neutrophils,and fibrocytes was also increased (P<0?05 or P<0?01).Meanwhile,pathological changes of chronic eczema were shown in the model group.Compared with those in the model group,the auricular thickness and weight were decreased in acupuncture group (P<0?05),the number of inflammatory cells were lowered to some extent (P>0?05),and the pathological changes of chronic eczema were relieved.Conclusion Acupuncture exerts an intervention on allergic reaction type Ⅳ.

  Key words: ALLERGIC REACTION /acupuncture & moxibustion therapy;SKIN/pathology;
DISEASE MODELS,ANIMAL;GUINEA PIGS;POINT LI11(QUCHI);

  Ⅳ型变态反应是由细胞介导的迟发性超敏反应所致的皮肤病,是常见的变应性炎症性皮肤病。其中最常见的有慢性湿疹和变态反应性接触性皮炎,临床特点表现为剧烈瘙痒,有多形性皮疹及渗出倾向,易于复发并趋向慢性化[1]。临床研究证实针灸治疗Ⅳ型变态反应性皮肤病,具有抗炎、止痒、调节机体免疫功能的作用[2]。本实验观察了针刺对Ⅳ型变态反应模型豚鼠的影响,为临床提供针刺治疗Ⅳ型变态反应的理论依据,现将结果报道如下。

  1材料与方法

  1?1动物及分组

  普通级雄性白化豚鼠,体质量250~300g,由广州中医药大学实验动物中心提供。合格证编号:0021021,0025124。按随机数字表法将36只豚鼠分为3组,即空白组、模型组、针刺组。空白组不给予任何处理,模型组除造模外不给予任何处理。

  1?2主要试剂与仪器

  2,4?二硝基氯苯(DNCB)由中国上海华强试剂有限公司提供,批号20070103;6805?2型电针治疗仪(上海医用电子仪器厂生产);华佗牌28号1寸毫针(苏州医疗用品厂出产);6mm圆形打孔器、分析天平、轮转式切片机、染色机、脱水机、电热恒温干燥箱、光学显微镜及显微摄像系统等器材均由广州中医药大学针灸推拿学院中心实验室及第一附属医院病理室提供。

  1?3模型复制豚鼠造模方法

  参照Boyera[3]及王国江等[4]的报道。首先于豚鼠颈背部剪毛,面积2cm×2cm大小,50mg/L 2?4?二硝基氯苯(DNCB)丙酮溶液50 μL外涂致敏;2周后豚鼠左耳内侧涂1mg/L DNCB丙酮溶液100 μL作为激发,每周1次,连续4周;第4次激发后72 h将豚鼠随机分组处理。

  1?4治疗方法

  针刺组在慢性湿疹造模完成后,根据《实验针灸学》[5]取曲池(双)、血海(双),并参照人体有关穴位,以动物比较学方法定位。用1寸毫针刺入所选穴位,将针柄分别连接至电针治疗仪的电极上,疏密波进行治疗,5~10次/s,以豚鼠能安静耐受为宜。每天针刺1次,每次20min,治疗5d后间隔1d,继续治疗5d,共治疗10次为1个疗程,完成后取材。

  1?5观察指标

  1?5?1耳厚度及耳质量于激发后72h以直径5mm的金属打孔器于左耳部造模处取组织块,同时右耳相同部位打孔,测量所取耳部厚度,同时用电子天平称取左右耳组织块质量,计算激发后左右耳厚度差及左右耳质量差。

  1?5?2中性与嗜酸性粒细胞及单核细胞与淋巴细胞计数将各组左耳组织块制成常规苏木素?伊红(HE)染色切片,在光镜下用网形目镜测微尺细胞数,以单盲法计数每mm2中性与嗜酸性粒细胞数及单核细胞与淋巴细胞数。判断标准(每mm2炎症细胞数):(-)为真皮内无单核细胞、淋巴细胞及中性与嗜酸性粒细胞;(+)为单核细胞或淋巴细胞及中性与嗜酸性粒细胞10个左右;(++)为单核细胞或淋巴细胞及中性与嗜酸性粒细胞20个左右;(+++)为单核细胞或淋巴细胞及中性与嗜酸性粒细胞30个左右。

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