【摘要】： 目的：制备丹参酮脂质体并测定含量及包封率。方法：采用蒸发超声法制备丹参酮脂质体，高效液相色谱法检测丹
参酮含量及包封率。结果：色谱条件下丹参酮与辅料、溶剂峰分离良好，丹参酮在5．0—50 mL范围内线性关系良好。3组丹参酮
脂质体包封率分别为96．28％，96．75％，97．22％。结论：丹参酮脂质体制备工艺可行，质量控制方法简单、准确。
【关键词】丹参酮；脂质体；高效液相色谱法

中药丹参具有扩张血管、改善微循环、抗凝血、消血栓、
降低血液黏度、抗菌抗炎及提高机体免疫力等作用，其生理
活性成分为丹参酮和丹参素等【l1。丹参中丹参酮含量高、药理
活性强。丹参酮是中药丹参根的乙醚或乙醇提取物，其中含
有10种成分，总称丹参酮12l。皮肤科应用丹参酮治疗痤疮，具
有良好的效果，是目前临床治疗痤疮的比较有效的药物[31。自20
世纪60年代脂质体作为药物载体应用以来，目前世界上已有
多个脂质体制剂得到批准应用。脂质体可以较好地解决皮肤
屏障等问题，故笔者将丹参酮制备成脂质体，并采用HPLC法测
定其含量及包封率。
1 试剂与仪器
紫外可见分光光度计(美l~Biogate公司)；高效液相色谱
仪，色谱C。 柱(4 m，150 minx3．9 mm)(日本岛津公司)；超声
波分散仪(Meico Fisher Scientific公司)；冷冻真空干燥机(美国
LABCONCO公司)；激光粒度分析仪(英国马尔文公司)；恒温磁
力搅拌器(金坛市富华仪器有限公司)；电子天平(湖南湘仪医
疗器械厂)；旋转蒸发仪(上海青浦沪西仪器厂)；循环水真空
泵(上海亚荣生化仪器厂)；高速搅拌机(IKA WERKE公司)。
大豆卵磷脂(纯度>95％，上海化学试剂公司)，胆固醇(上
海化学试剂公司)，丹参酮对照品(湖南宏远生物技术开发有
限公司，批号：200607011，丹参酮原料药(湖南宏远生物技术
开发有限公司生产，批号：20060708，纯度99％)，葡聚糖凝胶
G一50(上海化学试剂公司，进口分装)，甲醇(江苏汉邦有限责
任公司，色谱纯)，曲拉通X一100(上海化学试剂公司)，乙醚2 方法与结果
2．1 配方设计与制备方法丹参酮脂质体以磷脂和胆固醇
为膜材，加入三蒸水终体积为10 mL。将磷脂、胆固醇、丹参酮
按比例混匀，再加入适量乙醚溶液充分溶解，真空减压，去除
有机溶剂，得均匀千膜，冉加入乙醚溶解，加入水溶液混合，
转入超声波乳化器，在一定超声强度下持续超声数分钟，然
后进行旋转蒸发，真空减压，去除有机溶剂，充氮气，得到粒
径均匀的脂质体。此过程一直在氮气下工作。真空冷冻干燥
后分装。
2．2 色谱条件与系统适应性 色谱柱为C。 柱，流动相：水f含
0．5％ 三乙胺)一甲醇一四氢呋1~N(45：55：5，v／v厂v) ，柱温为室温，
检测波长为254 nnl，流速为1 mL／min，进样量为20 L。采用
外标法。存选定的色谱条件下，以丹参酮计算理论塔板数为
4458，符合中国药典高效液相色谱分析方法的要求。
23 色谱行为 取丹参酮对照品溶液、空白脂质体破乳溶液
(破乳采用曲托通x一100)和丹参酮脂质体各20 L进样分析。
丹参酮的保留时间约为l7．5 nlin，空白脂质体只在5 nlin以前
有色谱峰，表明辅料对丹参酮的测定无干扰?
24 标准曲线取干燥至J匣重的丹参酮对照品50 mg，精密称定，
置50 mI 量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对
照品溶液。精密量取对照品溶液0．5，1．0，2．0，3．0，4．0和5．0
mL，分别置100 mL量瓶中，各三蒸水至稀释至刻度，摇匀。按
上述色谱条件，每次进样20 L，实验结果表明，当丹参酮在
5—50 Ixg／mL的浓度范同内，以对照品峰面积fy)为纵坐标，对
照品浓度 )为横坐标作图，得一直线。回归方程为y=一
7 1．2235+254．7963X ，r=0．9752。
2．5 精密度测定取上述浓度为5．0，10．0，20．0，30．0，40．0，
50．0 txg／mL的丹参酮对照品溶液，于1 d和1周内重复进样5
次，进样量为20 L，测定日内精密度和日间精密度。日内差
异RSD％为0．95％(n=5)，日间差异RSD％为1．1 2％(n=5)
2．6 回收率测定按处方比例加入0．5 mL空白脂质体混悬
液至l一5号100 mL棕色容量瓶中，依次准确加入丹参酮对照
品贮备液0．5，1．0,2．0，3．0，4．0和5．0 mI ，加流动相溶解并稀释至
刻度，摇匀即得浓度范围为5—50 Ixg／mL的样品溶液，分别进样
20 I ，测定峰面积，连续5次，计算回收率，结果平均回收率为
98．1 l％f =6)，RSD％为0．65％。
2．7 脂质体中丹参酮的含量测定 精密吸取丹参酮脂质体
0,5 mLf相当于丹参酮0．5 rag)，置于25 mL棕色容量瓶中，曲托
通破乳，加入流动相稀释对刻度，摇匀，作为供试液；准确配制
浓度为20．0 g，I11L的丹参酮对照品溶液。取上述溶液各20 L
进行分析，记录色谱冈 按外标法计算 供试品中丹参酮的
含量。不同批号丹参酮脂质体中药物含量测定结果见表1。
2,8 丹参酮脂质体包封率的测定取丹参酮脂质体100 p．L
于5 mI 褐色容量瓶，补充甲醇至刻度，摇匀，HPLCi~,0定药物
含量，乘以稀释倍数即得全药浓度：取相应丹参酮脂质体1 mL，
采用葡聚糖G一50凝胶柱，以蒸馏水为洗脱液，流速l mIJrnin，
过滤分离丹参酮脂质体及游离丹参酮，收集所有丹参酮脂质
体准确测量其体积，HPLCiN定药物含量 包封率=c脂 总×
100％。测定3个批号脂质体的包封率分别为96．28％，96．75％，
97．22％ 。
表1 含量测定结果(标示量％。n=3)
2．9 丹参酮脂质体粒径大小测定室温下用激光粒度仪测
定其平均粒径，入射角度90。，设定样品温度为25℃时进行测
量，每个样品连续测量3次 测得丹参酮脂质体粒径均匀，粒
径为(152+12)nnl。
3 讨 论
丹参酮属于脂溶性成份，在丹参药材巾含量高：已有实
验证明，丹参酮除具活血化瘀的作用外，还具有抗雄性激素
和温和的拟雌性激素样的功效，且对痤疮杆菌、金黄色葡萄
球菌等多种致病菌有显著的抑菌作用；其抗炎作用几乎和氢
化可的松相近 ÷制成的丹参酮油膏对痤疮、皮肤过敏、皮炎、
感染化脓等有较好的疗效，安全无副作用 ，：
本研究采用旋转蒸发超声法制备的脂质体粒径均匀，分
布范嗣窄，药物含量稳定，包封率为90％以卜。冻干时加用海
藻糖作为保护剂：本研究采 }}j高效液相色谱测定法，通过提
高流动相中水的比例，使保留时间延长，由于色谱柱的差异，
可适当调整流动相的比例，以满足含量测定的要求。此法可
用来测定本品含量，结果准确可靠，重现性好。实验表明，采
用高效液相色谱法对丹参酮含量进行测定，可作为质量控制
方法。试验中选用水一甲醇一四氢呋哺作为流动相，因样品较
纯，辅料明确，分离效果良好。

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(收稿日期：2007—06—17 编辑：朱民)